پایان نامه بررسی میزان ATP در اسپرم مولدین نرماهی كفال طلائی (رشته شیلات)

پایان نامه بررسی میزان ATP در اسپرم مولدین نرماهی كفال طلائی. (رشته شیلات)

چکیده

   کفال ماهیان دریای خزر یکی از مهمترین ماهیان شیلاتی این دریا می باشند.که پس از انتقال از دریای سیاه به دریای خزر، توانستند خود را بااکوسیستم این دریا مطاقبت دهند.

   هدف از این تحقیق بررسی میزان ATP اسپرم ماهی کفال طلایی در شرایط  زمانی،دمایی و محلولهای تداوم بخش (Extender)  مختلف بوده است. بدین منظور میزان ATP اسپرمهای تازه نمونه گیری شده در دماهای مختلف      (°C12- 10،20 -18)، میزان  ATPاسپرمهای نگهداری شده دردماهای مختلف (°C 4،Room temperature ) به مدت 6 ساعت، میزان ATP اسپرمهای نگهداری شده در محلولهای تداوم بخش (extender)مختلف (گلیسرول، محلول نمک 7/0% ، محلول نمک 65/0%) به مدت 5 روز،  میزان ATP اسپرمهای نگهداری شده در همان شرایط به مدت 10 روز، به روش فوق حساس بیولومینوسانس اندازه گیری گردید.

    براساس آزمایشات انجام شده در این تحقیق، غلظت ATP اسپرمهای تازه نمونه گیری شده در دمای °C 12- 10، 22/7 ± 04/74درصد غلظت ATP اسپرمهای تازه نمونه گیری شده در دمای °C20- 18 بود.اسپرمهای نگهداری شده در دمای °C 4 یخچال به مدت 6 ساعت و اسپرمهای نگهداری شده در دمای آزمایشگاه به مدت 6 ساعت به ترتیب 91/0 ± 26/90 درصد و 49/1 ± 17/17 درصد ATP خود را حفظ کردند. نگهداری اسپرم درextender های مختلف (گلیسرول، محلول نمک 7/0% ، محلول نمک 65/0%) به مدت 5 روز نشان داد که گلیسرول و محلول نمک 65/0%، درصد بالاتری از ATP را نسبت به محلول نمک 7/0% حفظ کردند. نگهداری اسپرم درهمان extender‌ها  به مدت 10 روز نشان داد که گلیسرول درصد بالاتری از ATP را نسبت به  محلول نمک 7/0% و 65/0% حفظ کرد. اسپرمهای نگهداری شده در گلیسرول در دمای °C 15-  بعد از 5 روز و اسپرمهای نگهداری شده در گلیسرول در دمای °C 15-  بعد از 10 روز به ترتیب 5/4 ± 19/74 و 2/6 ± 67/47 درصد ATP خود را حفظ کردند.  اسپرمهای نگهداری شده در محلول نمک 7/0%   در دمای °C 1 بعد از 5 روز و اسپرمهای نگهداری شده در محلول نمک 7/0%  در دمای °C 1 بعد از 10 روز به ترتیب 81/2 ± 65/13 و 06/0 ± 69/0 درصد ATP خود را حفظ کردند. اسپرمهای نگهداری شده در محلول نمک 65/0% در دمای °C15-  بعد از 5 روز و اسپرمهای نگهداری شده درمحلول نمک 65/0%   در دمای      °C 15 -  بعد از 10 روز به ترتیب 68/6 ± 58/73 و 12/0 ±05/1 درصد ATP خود را حفظ کردند.

     براساس نتایج به دست آمده برای حفظ میزان ATP اسپرم ماهی کفال طلایی، نمونه گیری در دمای °C20- 18 و نگهداری در گلیسرول توصیه می شود.  

فهرست مطالب

عنوان                                                                                                          صفحه

چكیده-------------------------------------------------------------2-1

مقدمه---------------------------------------------------------------3

فصل اول : مروری بر تحقیقات گذشته

1-1 پیشینه تحقیق---------------------------------------------------- 8-5

1-2 تاكسونومی----------------------------------------------------- 9-8

1-3 مشخصات كلی راسته كفال ماهی شكلان -----------------------------------9

1-4 مشخصات خانواده كفال ماهیان ----------------------------------------10

1-5 مشخصات كفال طلایی -------------------------------------------12-10

1-6 زیست شناسی كفال طلایی -----------------------------------------13-12

1-6-1 مشخصات زیستی كفال طلایی ---------------------------------------13

1-6-1-1 تحمل درجه حرارت --------------------------------------------13

1-6-1-2 تحمل شوری -------------------------------------------------13

1-6-1-3 تحمل مقادیر اكسیژن --------------------------------------------13

1-6-1-4 تغذیه كفال طلایی -------------------------------------------14-13

1-7 ارزش اقتصادی كفال ماهیان ----------------------------------------15-14

1-8 ارزش غذایی ماهی كفال --------------------------------------------- 16

1-9 پراكنش كفال ماهیان ---------------------------------------------18-16

1-10 دریای خزر-------------------------------------------------- 22-18

1-11 تولید مثل كفال طلایی -------------------------------------------23-22

1-11-1 دستگاه تولید مثل كفال طلایی ------------------------------------25-23

1-11-2 اسپرماتوژنز ---------------------------------------------------25

1-11-3 ساختمان اسپرماتوزوئید ------------------------------------------- 26

1-11-4 فعالیت اسپرماتوزوئید -------------------------------------------- 27

1-11-5 رابطه بین میزان ATP و تحرك اسپرم --------------------------------- 28

1-11-6 مكانیزم چرخشی انتقال انرژی در ATP سنتاز ------------------------- 31-28

1-11-7 AMP حلقوی بعنوان یك پیامبر ثانویه ------------------------------ 37-32

1-11-8 extenders ----------------------------------------------- 40-37

فصل دوم: روش تحقیق و مواد

2-1 مواد و وسایل مورد نیاز ------------------------------------------- 43-42

2-1-1 خصوصیات كیت تعیین ATP  --------------------------------------- 43

2-1-2 اجزای كیت تعیین ATP ------------------------------------------  43 

2-1-3 روش آماده سازی محلولها ------------------------------------------44

2-1-4 خصوصیات و كاربردهای بافر HEPES ----------------------------- 45-44

2-1-5 روش آماده سازی محلول بافر HEPES--------------------------------- 45

2-1-6 روش آماده سازی محلول بی كربنات سدیم------------------------------- 46

2-1-7 روش آماده سازی محلول گلیسرول 10% و گلوكزM 3/0 --------------------- 46

2-2 روش كار  ---------------------------------------------------- 50-46

فصل سوم : نتایج تحقیق

نتایج  ---------------------------------------------------------- 62-52

فصل چهارم: بحث و نتیجه گیری و پیشنهادات

بحث و نتیجه گیری ------------------------------------------------- 69-64

پیشنهادات ---------------------------------------------------------- 70  

منابع فارسی ---------------------------------------------------------71

منابع لاتین------------------------------------------------------- 76-72